基因筛选、克隆、表达

      瀚海新酶生物科技有限公司依托武汉生物技术研究院与上海交大微生物代谢重点实验室研发平台,拥有世界一流的研发条件,其研发团队掌握先进的高通量筛选技术、基因克隆、表达技术。

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1. 高通量筛选技术

      凭借液滴微流控技术可以将传统的筛选体系微型化至pL级单细胞水平,反应体积缩小了一百万倍以上,从而大大降低了筛选的试剂消耗,筛选成本也大幅度降低;借助微流控芯片可以对微反应器的各类生化指标(酶、抗体、小分子代谢产物等)进行高效检测及筛选,筛选通量高达108/天,比常规筛选方法高出1000倍以上,从而大大提高从广阔基因序列空间中探索阳性基因的效率。

高通筛选原理.jpg   筛选案例.png 

     用高通量筛选体系,本公司成功对一系列重要的医药用酶进行了性质优化,包括肌氨酸氧化酶、果糖基肽氧化酶、酮胺氧化酶、3a-羟基类固醇脱氢酶、胆固醇氧化酶以及尿酸酶等。目标酶经过改造,能够很好地应用于临床诊断、药物生产等领域,该体系在推动医药产业进步有重大的应用潜力。

     此外,针对近年来抗体类药物在医药行业的异军突起,本公司与时俱进,将微流控高通量筛选体系进行升级改造,使之应用于抗体的高效进化筛选,能够高效筛选高产、高亲和力的抗体突变株,目前已成功获得了多个重要抗体的高产细胞株;同时,利用液滴微流控技术还可以对细胞株进行高通量培养基组分优化,经优化的培养基可以使抗体产量增加2-10倍,具有广阔的应用前景。

2. 基因工程菌的构建、表达

2.1 构建重组质粒

1) 扩增并抽提含有目的基因的载体质粒。

2) 将目的基因亚克隆到合适的表达质粒上。

3) 测序验证构建质粒的准确性。

2.2 转化宿主细胞

1) 扩增并抽提构建好的表达质粒。

2) 将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。

3) 至少挑选3个阳性克隆于LB培养基中扩增并选择合适的条件,SDS-PAGE 检测蛋白表达情况,筛选出合适菌株。

3. 我们的优势:

1) 国际领先的高通量筛选平台

2) 金品质:品质源于技术领先,瀚海新酶完美解决PCR问题

3) 大片段基因组克隆,最长一次扩展15kb

4) 专业的团队,丰富的分子克隆经验,十余年的分子实验操作实战经验

5) 可提供上百种载体,应用于各种表达系统

4. 服务流程

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