产品概述
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| One-Step Multiplex RT-qPCR Master Mix(ONE TUBE) | HMD3913-01 | 100rxn |
| HMD3913-02 | 1000rxn | |
| HMD3913-03 | 5000rxn |
注意事项
2.引物设计相关建议/要求：
| 类别 | 建议/要求 |
| 长度 | 18-30个碱基较为合适； |
| GC含量 | 40-60% |
| Tm值 | 1.常规引物设计软件均可以给出Tm值(推荐 使用Oligo 7); 2.简单的Tm值计算公式为：Tm=4℃*(G+C) +2℃*(A+T); 3.建议正向和反向引物Tm值尽量接近； 4.建议引物设计Tm值在55-60℃内，提高退 火温度可以增加PCR试剂的特异性。 |
| 引物设 计 |
1.建议PCR扩增产物长度在70-200bp之间； 2.尽量避免在模板的二级结构区域内设计引 物 ； 3.避免正向和反向引物3'端形成2个或以上 的互补碱基以减少引物二聚的形成； 4.引物3'端不能有多于3个连续的G或者C, 引物3'端末端碱基不能为T; 5.引物自身不应存在互补序列，否则引物自身 会折叠成发夹状结构； |
3. 探针设计相关建议/要求：
| 类别 | 建议/要求 |
| 长度 | 18-30个碱基较为合适 |
| 探针设计 | 1.探针建议使用HPLC级别以上纯化，否则残 留的未结合荧光染料会造成荧光本底升高从 而降低检测的灵敏度； 2.探针5'端应避免使用碱基G; 3.探针建议Tm值在65-70℃; 4.如探针中含有突变，尽量控制在两端，不要 在探针中部存在突变。 5.探针尽量不要存在二级结构，如必须有，须 控制探针Loop环Tm值<40℃。 |
