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肌氨酸氧化酶的表达?

来源:瀚海生物市场中心 时间:2022-10-13 作者:瀚海新酶 浏览量:296

1.肌氨酸氧化酶以BL21(DE3)为宿主菌,将SAOpRSF进行转化,挑取单菌落于3mlLB培养基培养过夜;2.以1∶500比例将菌液转接至400mlLB培养基,恒温在37℃,230rpm培养至OD600=0.4‑0.6;3.加IPTG诱导,IPTG诱导终浓度为0.5mM,保持25℃条件下表达8小时后收菌。BL21(DE3)菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。普通大肠杆菌没有t7RNA聚合酶,所以不能表达那些载体上的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于BL21的染色体上,就叫BL21(DE3)。

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