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产品概述
T7 RNA 聚合酶是一种来源于 T7 噬菌体的一种依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶,具有高度特异性的 5’→3 ‘端的 RNA 聚合酶活性。T7 RNA 聚合酶对 T7 启动子具有较高的特异性,能够以T7 启动子下游序列为模板合成大量的 RNA。
运输与保存方法:在 0℃ 以下进行运输;于 -25~-15℃ 保存,有效期为 24 个月。
单位定义:在标准反应体系下,于 37℃ 在 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸性不溶物所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
质量控制
• 核酸内切酶残留检测:40μL 反应体系中 200 U 本酶和 4μg pUC19 DNA 在 37℃ 下反应 16 小时,琼脂糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生变化。
• 核酸外切酶残留检测:50μL 反应体系中加入 200 U 本酶和 1μg λ-Hind III digest DNA 在 37℃ 下孵育 16 小时,琼脂糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生变化。
• 核酸切口酶残留检测:50μL 反应体系中加入 200 U 本酶和 1μg pBR322 DNA在37℃下孵育16小时,琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化。
• RNase残留检测:50μL 反应体系中加入 200 U 本酶和 1.6μg MS2 RNA 在 37℃ 下孵育 4 小时,琼脂糖凝胶电泳 RNA 谱带不发生变化。
• 热失活:75℃,10 min。
• 反应时间:37℃ 孵育 1-2 h。
• 反应终止:加入 2μL 0.2 M EDTA (pH 8.0 25℃) 或者 75°C 加热 10 min。
• DNA模板去除:可用 DNase I (2 U) 37 ℃ 处理 15 min。
反应抑制剂:金属离子螯合剂、NaCl 和 KCl,该酶对高浓度 NaCl 或 KCl 不耐受,当其浓度超过 150 mM 时,活性受到显著抑制(活性约降低 50%)。
嘌呤核苷磷酸化酶purine nucleoside phosphorylase,简称PNP或PNPase,该酶是嘌呤补救合成合成途径的关键酶之一,广泛存在于原核和真核生物中。
体检TBA——总胆汁酸 ,正常人肝脏合成的胆汁酸有胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和代谢中产生的脱氧胆酸(DCA)还有少量石胆酸(LCA)和微量熊脱氧胆酸(UDCA),合称总胆汁酸(TBA)。 总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(TBA)是在肝脏内合成与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸,然后被肝细胞分泌入胆汁,随胆汁至肠道后,在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸,有97%被肠道重新吸收后回到肝脏。如此循环不息。这样能使总胆汁酸发挥最大生理效应。更可防止总胆汁酸大量进入循环中对其它组织细胞的毒害。
1、血清总胆汁酸(TBA)是肝脏分泌到胆汁中最多的有机酸,肝功能受损时,胆汁酸代谢发生了变化,血中TBA很易升高,因此TBA已被认为是肝实质性损伤的灵敏指标。可以作为判断肝胆系统正常与否的重要信息。正常值0-10u mol/L,你的化验值22.6是升高的,可以作为早期肝损害的反映,但是应该结合其他肝脏功能检查,经过系统检查后再定。2、白细胞计数正常参考值:(4~10)×109/L(4000~10000/mm3)增高主要是急性感染、严重组织损伤、大出血、中毒、恶性肿瘤及白血病等。正常血液中含有粒性、单核性和淋巴性三类白细胞。粒细胞又根据胞浆中含有的颗粒性质不同,分为嗜酸性、嗜碱性及中性粒细胞三种。
总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(循环酶法)由试剂1和试剂2组成,试剂1包括:硫代辅酶、Good’s缓冲液(pH9.2);试剂2包括:3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、还原性辅酶(NADH)。基本参数:空白吸光度(光径1.0cm,波长410nm)≤0.50;空白吸光度变化率:△A/min<0.04;分析灵敏度:在测量50μmol/L的被测物时,吸光度变化率应在0.01~0.31之间;线性范围 0~180μmol/L,r≥0.990;批内精密度 CV≤10%;批间差 R≤10%;准确度:相对偏差≤10%。
硫代氧化型辅酶性状:淡黄色或黄绿色粉末,溶于水:50mg/ml,溶液呈清澈黄色至暗黄绿色,用途:生化研究,诊断试剂原料,保存:-20℃。
该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应,将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。
嘌呤核苷磷酸化酶在体外反应时,若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物,可以合成新的嘌呤核苷或类似物,现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物,如阿糖腺苷、利巴韦林等。
嘌呤核苷磷酸化酶按照PNP底物专一性和分子量大小,可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体,亚基分子量为25kDa,底物专一性不强,能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物;哺乳动物和部分微生物(Bacillus cereus、Bacillus stearothmophilusTH 6-2)PNP为三聚体,亚基分子量为30~32kDa,通常只接受肌苷、鸟苷为底物;某些微生物,如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌,会同时存在两种聚体PNP。
α-L-岩藻糖苷酶是一种溶酶体酸性水解酶,广泛存在于人体组织细胞、血液和体液中,参与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。在原发性肝癌患者血清中增高,是原发性肝癌的标志物之一。
α-L-岩藻糖苷酶是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶。其广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中。参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。由于肝癌患者α-L-岩藻糖苷酶明显升高,它被认为是原发性肝癌的一种新的肿瘤标记物。
α-L-岩藻糖苷酶临床意义:
降低:见于遗传性α-L-岩藻糖苷酶缺乏引起的岩藻糖积蓄病。
升高:见于原发性肝癌、转移性肝癌、肝硬化、急性肝炎等。