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产品描述
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可裂解赖氨酸和精氨酸 C 端侧的肽键,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。
瀚海新酶的重组胰蛋白酶消化液是一种微生物发酵的高纯度重组酶,不含动物源性,可替代猪或牛胰蛋白酶,用于免疫细胞治疗、疫苗、药物筛选、抗体等领域的细胞消化过程。本产品含有 EDTA,不含酚红。
产品性质
作用温和:因其纯度高,只有单一酶种作用,解离的特异性更强并且毒性更低。这一机理也可降低胰蛋白酶及其他提取试剂中的多种蛋白酶的解离破坏作用。
无动物源性:生产过程中不使用任何动物源原料,无外源病毒污染等潜在不确定因素的风险,符合药品管理规定
稳定性好:低温条件,2~8℃/-20~-5℃ 可避光储存 12 个月
使用方便:本品为无菌制剂,可替代实验方案中的胰蛋白酶,稀释可降低活性
储存条件:2-8℃,避光。避免反复冻融
有效期:自生产之日起 12 个月。
运输条件:2-8℃,避光运输。
使用说明
重组胰蛋白酶消化液(10×)可用于分离具有强粘附性的贴壁细胞系。
1. 使用前于 37℃ 预热消化液及培养液。注:重组胰蛋白酶消化液可在常温下用于多种细胞的消化。
2. 吸出用过的培养基并丢弃。
3. 使用 5mL 不含钙离子和镁离子的 DPBS 缓冲液洗涤细胞,去除残余培养基,吸出培养基并丢弃。
4. 添加适当体积的重组胰蛋白酶消化液,以能覆盖细胞为限。
5. 37℃ 孵育细胞,孵育期间使用显微镜下观察,至细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者轻敲培养瓶发现细胞处于游离状态。
6. 在培养瓶中加入 5–10 mL 的预热完全的培养基。向各个方向倾斜以确保所有细胞均被悬浮,取细胞悬液至 15mL 离心管中。
7. 100×g 离心 5-10 分钟。
8. 弃去上清液,用 2–5 mL 预热的培养基重悬细胞沉淀。
9. 使用自动细胞计数器确定活细胞密度和存活百分比。
10. 根据您的细胞类型,按照常规方案进行后续实验。
注意事项:为了您的安全健康,请穿实验服并佩戴手套操作;本品不能用于人体。请于无菌环境下操作。
嘌呤核苷磷酸化酶purine nucleoside phosphorylase,简称PNP或PNPase,该酶是嘌呤补救合成合成途径的关键酶之一,广泛存在于原核和真核生物中。
体检TBA——总胆汁酸 ,正常人肝脏合成的胆汁酸有胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和代谢中产生的脱氧胆酸(DCA)还有少量石胆酸(LCA)和微量熊脱氧胆酸(UDCA),合称总胆汁酸(TBA)。 总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(TBA)是在肝脏内合成与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸,然后被肝细胞分泌入胆汁,随胆汁至肠道后,在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸,有97%被肠道重新吸收后回到肝脏。如此循环不息。这样能使总胆汁酸发挥最大生理效应。更可防止总胆汁酸大量进入循环中对其它组织细胞的毒害。
1、血清总胆汁酸(TBA)是肝脏分泌到胆汁中最多的有机酸,肝功能受损时,胆汁酸代谢发生了变化,血中TBA很易升高,因此TBA已被认为是肝实质性损伤的灵敏指标。可以作为判断肝胆系统正常与否的重要信息。正常值0-10u mol/L,你的化验值22.6是升高的,可以作为早期肝损害的反映,但是应该结合其他肝脏功能检查,经过系统检查后再定。2、白细胞计数正常参考值:(4~10)×109/L(4000~10000/mm3)增高主要是急性感染、严重组织损伤、大出血、中毒、恶性肿瘤及白血病等。正常血液中含有粒性、单核性和淋巴性三类白细胞。粒细胞又根据胞浆中含有的颗粒性质不同,分为嗜酸性、嗜碱性及中性粒细胞三种。
总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(循环酶法)由试剂1和试剂2组成,试剂1包括:硫代辅酶、Good’s缓冲液(pH9.2);试剂2包括:3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、还原性辅酶(NADH)。基本参数:空白吸光度(光径1.0cm,波长410nm)≤0.50;空白吸光度变化率:△A/min<0.04;分析灵敏度:在测量50μmol/L的被测物时,吸光度变化率应在0.01~0.31之间;线性范围 0~180μmol/L,r≥0.990;批内精密度 CV≤10%;批间差 R≤10%;准确度:相对偏差≤10%。
硫代氧化型辅酶性状:淡黄色或黄绿色粉末,溶于水:50mg/ml,溶液呈清澈黄色至暗黄绿色,用途:生化研究,诊断试剂原料,保存:-20℃。
该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应,将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。
嘌呤核苷磷酸化酶在体外反应时,若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物,可以合成新的嘌呤核苷或类似物,现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物,如阿糖腺苷、利巴韦林等。
嘌呤核苷磷酸化酶按照PNP底物专一性和分子量大小,可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体,亚基分子量为25kDa,底物专一性不强,能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物;哺乳动物和部分微生物(Bacillus cereus、Bacillus stearothmophilusTH 6-2)PNP为三聚体,亚基分子量为30~32kDa,通常只接受肌苷、鸟苷为底物;某些微生物,如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌,会同时存在两种聚体PNP。
α-L-岩藻糖苷酶是一种溶酶体酸性水解酶,广泛存在于人体组织细胞、血液和体液中,参与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。在原发性肝癌患者血清中增高,是原发性肝癌的标志物之一。
α-L-岩藻糖苷酶是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶。其广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中。参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。由于肝癌患者α-L-岩藻糖苷酶明显升高,它被认为是原发性肝癌的一种新的肿瘤标记物。
α-L-岩藻糖苷酶临床意义:
降低:见于遗传性α-L-岩藻糖苷酶缺乏引起的岩藻糖积蓄病。
升高:见于原发性肝癌、转移性肝癌、肝硬化、急性肝炎等。