货号 | 规格 |
HMD9901-01 | 192T |
HMD9901-02 | 48T |
预期用途
本试剂盒用于检测样本中 DNase 的污染状况。
注意事项
1、加样操作应尽量快,时间过长会影响实验准确性。
2、不同荧光酶标仪的参数不一样,首次测试前需调节合适的增益值,若酶标仪不具备设置增益值的功能,可选用荧光定量 PCR 仪(含FAM 通道)配套无 DNase 无 RNase 的 qPCR八联管或 qPCR 96 孔板使用。荧光定量 PCR 仪参数设置为 FAM 通道,反应程序 37℃, 1min (读取荧光) , 30 个循环,反应体积 100μL。
使用原始荧光曲线数据进行计算,第 1 个循环作为 RFU0,第 30 个循环作为 RFU30。由于不同仪器间信号值的差异,检测结果的解释可能不适用于荧光定量 PCR 仪,建议进行定量检测步骤,以测试浓度值进行污染判断。
3、所有试剂使用前应充分摇匀,加样时应将所加样物加入酶标板孔中底部,避免加在孔壁上部,加样时注意不可溅出,不可产生气泡。
4、试剂盒中标准品为 DNase I,其活性单位定义为:在 DNase I 反应缓冲液中,37℃条件下 10 分钟内能够完全降解 1µg pBR322DNA 所需的酶量[1],一个 DNase I 活性单位相当于 0.3 Kunitz 单位[2]。
5、为避免外源 DNase 污染,可使用 DNaseRNase 清除剂喷洒于实验台面、手套等表面,5 分钟后用洁净纸巾擦拭干净即可进行后续的实验操作。