本试剂盒采用阴选的方式，通过无柱磁性分离人 PBMC 中的 CD19+ B 细胞。分离过程中抗体和磁珠不会接触 CD19+ B 细胞，能够最大限度保持 B 细胞最原始的状态。试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非 CD19+ B 细胞，再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联，然后通过磁场进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可分离，分离后的细胞可立即用于后续应用，如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
|---|---|---|
| 人 CD19+ B 细胞分选试剂盒（阴选） | HSC100001-01 | 用于分离1×108个细胞 |
| HSC100001-02 | 用于分离5×108个细胞 | |
| HSC100001-03 | 用于分离1×109个细胞 |
产品组分
| 组分 | 缓冲液成分 | 功能 |
|---|---|---|
| Human Fc Blocker | PBS，0.1% BSA | 封闭 FcR 受体，降低抗体非特异性结合 |
| Human CD19+ B cell Isolation Cocktail | PBS，0.1% BSA | 识别非 CD19+ B 细胞抗体混合液，标记非目的细胞 |
| Streptavidin Nanobeads | PBS，0.1% BSA | 磁珠结合非 CD19+ B 细胞，通过磁场去除 |
保存条件
2~8℃避光保存，避免冻存。
使用方法
1. 材料准备
1）缓冲液：FACS Buffer（1×PBS + 0.02% EDTA + 2% FBS）。
2）耗材：70μm无菌尼龙滤网；无菌离心管。
3）仪器：离心机，磁力架。
2. 细胞准备
准备1×108 cells/mL PBMC单细胞悬液。
3. 磁性分离
1）取100μL Human Fc Blocker加入1mL样品中，并充分混匀；
2）取100μL Human CD19+ B cell Isolation Cocktail加入1mL样品中，常温孵育10min；
3）震荡混匀 Streptavidin Nanobeads 30s，待用；
4）取100μL Streptavidin Nanobeads加入1mL样品中，轻柔混匀磁珠和细胞，常温孵育5min；
5）孵育完成后，加入 FACS Buffer 到样品中，轻轻混匀（5mL流式管总体积加入至2.5mL，15mL离心管总体积加入至7.5mL）；
6）将样品置于磁力架上，静置3-5min；
7）倾斜磁力架，将样品倒入新的收集管中，收集样品。
注意事项
1. 推荐采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心分离 PBMC，不建议采用红细胞裂解液；
2. 采用 FACS Buffer 而不是 PBS 进行操作，能够提高细胞得率；
3. 确保 FACS Buffer 渗透压稳定，免疫细胞较为敏感；
4. 确保每一步无菌操作，谨防污染。
