快速封闭液(即用型,免洗)(以下简称“快封液”)是一款无蛋白成分快速WesternBlot的封闭液,可用于高效快速的封闭转膜后的NC或PVDF膜,可替代脱脂奶粉、BSA等传统封闭液,通用于常规抗体、磷酸化抗体、生物素标记抗体。
使用本产品,整个封闭过程仅需10min,无需洗涤,即可直接孵育一抗;总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品。
本产品配制在TBST中,含0.1%TWEEN20。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| 快速封闭液(即用型,免洗) | HSC070061 | 500mL |
运输与保存方法
冰袋运输。2-8℃保存,有效期12个月。
使用方法
WesternBlot中膜的封闭
1. 完成转膜后,用Western洗涤液洗涤蛋白膜1-2min。
2. 根据膜的大小,将一定体积的快封液倒入平皿或者其它适当容器中,确保封液后续能充分覆盖膜即可。对于常规的western,一张约6.6×8.5cm的膜推荐使用约10mL左右的快封液。
3. 用平头镊夹住膜的一角,将膜放置在WB无蛋白封闭液(1×inTBST)中,使封闭液完全浸没膜,置于水平摇床上封闭约10min(经多种抗体的测试封闭10min的效果很多时候会显著优于常规的BSA封闭1h的效果)。
4. 封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2. 本产品推荐仅使用一次,重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比很高的一抗,例如一些内参抗体,快封液可以重复使用2-3次。回收的快封液请勿与未使用过的快封液混合。
3. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为10min。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60min。此外,如有特殊需要,也完全可以4ºC封闭过夜。
4. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
5. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
6. PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。
7. 仅用于封闭使用,不可用于一抗二抗稀释。
